Migliorando la biosicurezza del trasferimento genico con vettori lentivirali

Il trasferimento genico mediato da vettori lentivirali (VL) possiede un eccellente potenziale terapeutico come dimostrato in recenti sperimentazioni precliniche e cliniche. Abbiamo precedentemente dimostrato che VL autoinattivanti e di generazione avanzata, sono associati a basso rischio genotossico rispetto ai vettori retrovirali comunemente utilizzati. Tuttavia, integrazioni di VL nel genoma della cellula ospite potrebbero alterare le funzioni di geni cellulari vicini al sito d'integrazione con conseguenze deleterie. Pertanto, è necessaria un'approfondita valutazione del rischio genotossico residuo. Primo scopo del progetto è la valutazione stringente e comparativa della tossicità potenziale di diversi VL autoinattivanti mediante l'utilizzo di saggi in vivo estremamente sensibili. Attraverso questi saggi valuteremo se l'aggiunta di sequenze isolanti in VL autoinattivanti possa ridurre la genotossicità del vettore dovuta all'attivazione di geni cellulari circostanti mediata da sequenze amplificatrici contenute nel vettore. Secondo scopo è la valutazione dell'impatto delle integrazioni di VL sul meccanismo di splicing dei geni cellulari circostanti e l'ingegnerizzazione dei VL al fine di ridurne il potenziale d'interferenza nello splicing cellulare. Infine, mediante tecniche ad alta processività ed efficienza monitoreremo nel tempo le integrazioni di VL in campioni clinici e preclinici al fine di acquisire nuove conoscenze funzionali sulla biosicurezza dei VL autoinattivanti.